飼料中粗蛋白的測定過程解析

1.粗蛋白的測定原理：

凱氏法測定試樣中的含N量，即在催化劑作用下，用H2SO4破壞有機物，使含N物轉化成（NH4）2SO4，加入強堿進行蒸餾使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，測出N含量，將結果乘以換算系數6.25，計算出CP含量。

2.粗蛋白的測定材料與器具：

粗蛋白的測定需要使用到的儀器有：H2SO4、混合催化劑、NaOH、硼酸、混合指示劑、HCl標準液、蔗糖、硫酸銨、硼酸吸收液

粗蛋白的測定儀器設備：粉碎機、分樣篩、分析天平、消化爐、滴定管、全自動定氮儀、錐形瓶、容量瓶、消煮管

3.粗蛋白的測定方法步驟

1、試樣的消煮，稱取試樣0.5g，準確至0.0202g，放入消煮管中加入6.4g混合催化劑與試樣混合均勻，再加入12ml H2SO4將消煮瓶置于電爐上加熱，開始小火，待樣品焦化、泡沫消失后，再加強火力（360-410℃）直至透明的藍綠色，然后再繼續加熱至少2h。

2、NH3的蒸餾

將試樣消煮液冷卻，加入20ml蒸餾水，轉入100ml容量瓶中，冷卻后用水稀釋至刻度，搖勻，作為試樣分解液。將半微量蒸餾裝置的冷凝管末端浸入裝有20ml硼酸吸收液和2滴混合指示劑的錐形瓶內。蒸汽發生器的水中應加入甲基紅指示劑數滴，硫酸數滴，在蒸餾過程中保持此液為橙紅色，否則需補加硫酸。準確移取試樣分解液10-20ml注入蒸餾裝置的反應室中，用少量蒸餾水沖洗進樣入口，塞好入口玻璃塞，再加入10ml氫氧化鈉溶液，小心提起玻璃塞使之流入反應室，將玻璃塞塞好，且在入口處加水密封，防止漏氣。蒸餾4min降下錐形瓶使冷凝管末端離開吸收液面，再蒸餾1min,用蒸餾水沖洗冷凝管末端，洗液均需流入錐形瓶內，然后停止蒸餾。

3、滴定

蒸餾后的吸收液用HCl標準溶液滴定，溶液由藍綠色變為灰紅色為終點。

4、空白測定

稱取蔗糖0.5g代替試樣進行空白測定

5、計算

CP=

V2：滴定試樣時所需標準溶液體積ml

V1：滴定空白時，所需標準溶液體積ml

C：鹽酸標準溶液濃度mol/l

M：試樣質量 g

0.0140：與1mol HCl標準溶液相當的以g表示的N的質量。

6.25：N換算成CP的平均系數。

6、重復性

每個試樣的平行樣進行測定，以其算術平均什為結果。

當粗蛋白質在25%以上時，允許相對偏差為1%；

當粗蛋白質在10%~25%之間時，允許相對偏差為2%；

當粗蛋白質在10%以下時，允許相對偏差為3%。

       飼料是家畜成長的營養來源，飼料中蛋白質含量的高低，直接決定了家畜的質量高低。因此，飼料中蛋白質的含量測定是一個很重要的步驟。而蛋白質存在于一切動植物體中，是一切生命活動的物質基礎。家畜從飼料中攝取蛋白質及其分解產物，以組成自身的蛋白質，因此，飼料中蛋白質含量的分析就成為評價飼料營養價值的主要指標。